图说：进入PCR实验室必须全副武装 新民晚报记者 徐程 摄（下同）
这两天，经历了第一批网格化筛查的市民发现，有些小区已经重新进入决赛圈，有些研判下来还是有风险的，则延长了管控时间。其中起到关键作用的，是一份份核酸报告。
对于市民来说，核酸检测看似只有两步：登记采样，等待数小时后在健康云App上查询结果。事实上，在这看似轻松的两步背后，还凝聚了基因扩增实验室（PCR实验室）检验人员的大量工作。
凌晨2时，这座城市的万家灯火早已熄灭，而申城各家核酸检测实验室依旧灯火通明。一位位身着厚重防护服的检验人员，正在实验台前一丝不苟地进行核酸样本的检测，汗水不住地从额头冒下，嘴里呼出的热气模糊了护目镜。
采样后，你的标本经历了怎样的奇幻漂流之旅？新民晚报记者近日走进同济大学附属东方医院南院检验科PCR实验室，吴文娟主任为大家揭秘一份准确的核酸报告是如何诞生的？
图说：待检测的核酸标本堆了满满一桌子
标本拥有了身份证
医生，我今天在你们医院做的核酸什么时候有结果呀？还要多久呀？
医生，我急需核酸报告，能加急帮我检测一下吗？
这几天，申城各医疗机构的医务人员总会接到这样的问询电话。很多人想象，核酸采样后，直接用机器检测很快就能出结果了。但其实，自从采样护士在你的鼻部或咽部轻捻慢拢后，后续还包括了标本签收、核酸提取、核酸转移、核酸扩增、结果审核等步骤。
核酸检测样本采集后，采集人员会清点数目，并用密封袋包装好，用消毒剂喷洒消毒，然后放进标本转运箱，由专人送到核酸检测实验室。检测人员收到样本后会先对转运箱消毒，并在开启后对转运箱内壁和标本采集密封袋二次消毒，之后才是拆开密封袋取出样本。
核酸的采集管上都有条码信息，签收人员要理清标本来自哪一个社区或人群，是单采还是混采。吴文娟表示，另外，我们还会留意标本上的时间，便于日后需要时回溯。
之后，核酸标本就将经历奇幻漂流的第二步——要有身份证啦！检验人员则将这一步称为标本前处理。PCR反应是在96孔板上实现的，每一个孔位都该有自己独一无二的身份。吴文娟说。
图说：检验人员为刚刚送到样本进行编号和信息录入工作
看似只是前处理，但防备之心可是一点儿也不能松。检验人员要识别空管或溢洒情况的发生。尤其在大人群10:1混采时，小小的试管被拭子挤满，一旦阳性标本出现了溢洒，一方面可能造成其他标本结果的污染（假阳性），另一方面对实验室的生物安全产生威胁——这也是PCR实验室的检验人员同样要穿成大白模样的原因——医用帽子、N95口罩、面屏、护目镜、医用防护服、隔离衣、一次性鞋套、两层手套，这些束缚却能给检验人员创造最安全的环境。
此外，PCR实验室要求严格分区，最好是负压实验室。空气流动只会从外向内，那么实验室里的污染就不会扩散到外界，可以保证实验室外面的安全。
与病毒擦肩而过或只有2毫米
拿到身份证的核酸标本并不能直接测试，而是要先提取核酸，对其进行扩增。因此，核酸标本奇幻漂流的下一站，是PCR加样区——简单来说，检验人员要把病毒的遗传物质（核糖核酸）给揪出来
此时，检验人员戴着双层手套，在生物安全柜内一管一管地拧开螺旋盖，手工吸取样本，加入核酸提取板孔中，再拧上螺旋盖将标本放回原处。有多少份样本就有多少次的重复操作。吴文娟说。那时，检验人员与新冠病毒擦肩而过的距离可能只隔着两层乳胶手套——也就是2毫米，但核酸检测工作不允许他们害怕。
图说：检验人员正在进行核酸提取环节中的加样步骤
获得核酸后，检验人员用移液枪将核酸转移至事先准备好反应液的反应管里，制成反应体系，让它进入奇幻漂流的下一站：扩增分析区。
不能出错，不能有遗漏，不能发生生物安全事故。可以说检验人员全身时刻处于高度紧张的状态。就单说‘加样’，检验人员要用极小的枪头将每个提取好的核酸，大概是一滴水的四分之一加入到试剂中，每一步操作都必须十二分谨慎。吴文娟告诉记者，我们迫切希望能有开盖、加样的仪器来‘解放’检验人员，可现有的仪器在速度上并不能令人满意，遇上大样本筛查只能靠手工操作。
让它变多才能检测出来
经历了复杂费时的前期制备过程，样本终于来到了奇幻漂流的关键一站。样本的采样质量如何、核酸提取的质量如何、结果如何都将在此处见分晓。
这里不得不提一下曾斩获诺贝尔奖的聚合酶链反应（PCR），这是20世纪80年代中期发展起来的一项体外核酸扩增技术，它可以将目标基因片段于数小时内扩增百万倍至数亿倍，成为当今生命科学研究最为重要且广泛使用的技术手段之一。
怎么理解扩增？如果把标本提取出来的核酸看作是一块土地，新冠病毒是种子，如何知道土地里有没有种子？简单的方法是，加点水和肥料（试剂），让种子一个变两个、两个变四个、四个变八个……病毒是看不到的，而且微量标本也不容易检测到，所以要让它变多，才方便检测出来。吴文娟解释。
图说：经过复杂的前期制备工作，才能在PCR仪上进行扩增检测。上机后，就是历时约1.5小时扩增检测，而且中间不能有停顿、不能有断电、不能有仪器故障，核酸检测才能完成
当反应管在机器上开始检验后，也就意味着开弓没有回头箭——从采样到核酸制备任何一个缓解出现问题都可能导致返工重测，从而使报告时间加倍。
3月15日，国家卫健委发布《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》。其中，《方案》将解除隔离管理和出院标准修改为连续两次新型冠状病毒核酸检测N基因和ORF基因CT值均≥35（荧光定量PCR方法，界限值为40，采样时间至少间隔24小时），这也让很多小白知道，这儿的CT并非到医院拍个CT，而是指扩增的阈值。简单来说， CT值越低，说明阳性越强；CT值越高，说明阳性越弱。
作为初筛实验室，只能向疾控中心报告疑似阳性。我们会将CT值登记报告，上报相应区域的疾控部门。随后根据疾控的要求转运原管标本以供复核。吴文娟说，而PCR实验室也会通过紫外线消毒。据介绍，通常阴性标本会储存一两天以备查验。
向你飞奔而来的报告背后是汗水
走到这，核酸标本的奇幻漂流之旅并没有结束。检测人员需要对扩增结果进行分析：包括同批随样本检测的阴阳性质控结果是否在控、基线设置、逐孔分析内标及样本结果是否正常等。当阴阳性质控全部符合检测要求，排除假阴性、假阳性可能，对异常结果样本及时进行复核，确保无误后才能最终报告结果，并上传到健康云。
有人好奇，健康云核酸结果查询里，OFR1a/b阴性，N基因阴性是什么意思？吴文娟解释，这是新型冠状病毒核酸的两个特异性片段，一般同一份标本中两个基因检测结果均为阳性，会判断为阳性，单基因阳性则需复检。
图说：这几天，PCR实验室里的检验人员都在超负荷工作
现在我们检验科的工作包括了‘愿检尽检’——市民需要核酸阴性报告这张‘通行证’的；‘应检尽检’——住院患者和陪护，还有医院承担的密接、次密接及高风险人群的核酸检测。这几天，还有网格化筛查的任务。吴文娟的语气里透露着疲惫。
那仪器运行时，检测人员能轻松一会儿吗？并不是，此时，新的一批标本又来了，又要开始录信息，提核酸，加样……吴文娟说，随着核酸样本量不断增大，检验人员一直是在超负荷运转。
防护服是不透气的，全身罩在里面，刚穿上就会很热。加之机器一刻不停，热量积聚一天后整个实验室会非常闷热，即时开着空调室内温度也会达到28-30℃。此外，实验室里静电也很强烈，因此也特别干燥。她说，我们中的很多人已经连续几天都没有回过家了，大家都是‘5+2’‘白+黑’的节奏在工作，能够躺下来休息一会，就觉得很满足了。
新民晚报记者 郜阳